Cinq éléments de la réaction PCR
Il existe cinq substances principales qui participent à la
PCR réaction : amorces (les amorces PCR sont des fragments d'ADN et les amorces pour la réplication intracellulaire de l'ADN sont des brins d'ARN), enzymes, dNTP, matrices et tampons (qui nécessitent Mg2).
Déterminants spécifiques de PCR Réactions ① La combinaison spécifique et correcte des amorces et de l'ADN matrice ;
②Principes d'appariement de bases ;
③La fidélité de la réaction de synthèse de l'ADN polymérase Taq ;
④ Spécificité et conservation des gènes cibles.
La bonne combinaison d'amorces et de modèles est la clé. La combinaison de l'amorce et de la matrice et l'extension de la chaîne d'amorce suivent le principe de l'appariement de bases. La fidélité de la réaction de synthèse de la polymérase et la résistance à haute température de la TaqDNA polymérase permettent d'effectuer la combinaison (renaturation) de la matrice et de l'amorce dans la réaction à une température plus élevée, la spécificité de la combinaison est fortement augmentée et la fragment de gène cible amplifié Il peut également maintenir un haut degré de précision. Ensuite, en sélectionnant la région du gène cible avec une spécificité et une conservation élevées, le degré de spécificité sera plus élevé.
Foire aux questions sur PCR Réactions 1. Faux négatif
2. Négatif
3. Faux positifs